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產品名稱：小鼠結腸癌細胞
產品英文：CT26細胞
貨號：FS-01X9655

細胞培養條件： 1640+10%FBS+1%P/S

生長狀態：貼壁生長

產品規格：1×106

單位：T25/瓶

是否提供細胞STR：不提供STR報告

保存培養溫度（℃）37

運輸溫度（℃）：常溫
凍存培養基：
凍存細胞時必須使用的凍存培養基。凍存培養基中應含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的完全凍存培養基。
1）細胞凍存培養基是一種用于哺乳動物細胞的即用型完全凍存培養基，其含胎牛血清和牛血清比例經過優化，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果。
2）凍存培養基是一種化學成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養基，含10% DMSO，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養細胞凍存方案：
以下實驗方案介紹了培養細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案，必須參閱針對具體細胞的產品說明書。
1.配制凍存培養基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養基取決于用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時，利用傳代時用方法輕柔地使細胞從組織培養容器上脫離下來。用該細胞需完全培養基重新懸浮細胞。
3.采用血球計數器、細胞計數儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數儀測定細胞數和活細胞百分比。根據需活細胞密度，計算凍存培養基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細胞沉淀。
注：離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預冷的凍存培養基重新懸浮細胞沉淀，將其調整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應不時輕輕混合細胞，使其保持均勻的細胞懸液狀態。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C?；蛘?，將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下*。 

實驗材料：
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個； 人皮膚成纖維細胞,CCC-HSF-1細胞
3、50ml離心筒2個
4、滅菌培養皿1個，細胞培養瓶1個
5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個
6、細胞計數板1塊；
7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把；
8、酒精燈1臺；
實驗報告：
一、分離與培養：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，*將組織剪成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織完全被消化；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；
5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；
二、免疫熒光：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞*；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，*在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
細胞培養的優點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據要求可始終保持細胞活力，并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養一定代數后，得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。
直腸粘膜上皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)甲氧芐啶（標準品）質量規格：HPLC>98%,標準品Trimethoprim

非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS5B;Vero-HCV-NS5B 人卵巢癌細胞，SK-OV-3[SKOV-3]細胞 BT549(管癌細胞)西維來司鈉質量規格：含量大于98.5%Sivelestat 

人肺腺癌細胞;Calu-3醋甲唑胺(標準品)質量規格：HPLC≥99.0%,標準品Methazolamide

IL3RA Others Human 人 IL3RA / CD123 人細胞裂解液 (陽性對照) 齊拉西酮質量規格：含量≥99%Ziprasidone

CM-H029人臍帶單核細胞完全培養基100mL塞曲司特/西拉達司/塞拉司特質量規格：含量≥98.0%Seratrodast
CM-H083人臍動脈內皮細胞完全培養基100mL膽堿非諾貝特Choline Fenofibrate質量規格：美國進口

Hepa 1-6, 小鼠肝癌細胞丙磺舒?；?D-葡萄糖苷酸Probenecid Acyl β-D-Glucuronide質量規格：美國進口

人癌細胞;MDA-MB-453 人角膜成纖維細胞完全培養基 100mL諾氟沙星-d5Norfloxacin-d5質量規格：美國進口

人口腔角質細胞cDNAHOK cDNA4-含氧諾氟沙星4-Oxo Norfloxacin質量規格：美國進口

CCL17 Others Mouse 小鼠 CCL17 / TARC 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) N-羥基諾氟沙星N-Hydroxy Norfloxacin質量規格：美國進口
間充質干細胞生長添加物MSCGS偶氮錄嶙Ⅳ，英文名或英文縮寫：CPA-Ⅳ，級別：色固，規格：25克

C2 Others Mouse 小鼠 C2 / Compleme Compone 2 人細胞裂解液 (陽性對照) BOC-L-半胱安醋 BOC-CYS-OH 0887-92-0

人B細胞瘤細胞;RAMOS(RA.1)細胞核堅牢紅，英文名或英文縮寫：Nuclear fast red，級別：色固，規格：250毫克

大鼠垂體瘤細胞;GH3 膀胱移行細胞癌細胞，T24細胞 MDBK (NBL-1)細胞，牛腎細胞纖維玻璃，英文名或英文縮寫：Glass Fiber，級別：BR，99%，規格：25克

HNE2, 人鼻咽癌細胞系 HumanN-Octyl-b-D-Thioglucopyranoside 1g 原裝 Amresco J575
小鼠結腸癌細胞RBE, 人肝膽管癌細胞6-去氟-6-羥基利培酮質量規格：美國進口6-Desfluoro-6-hydroxy Risperidone

HUVEC, 人臍靜脈內皮細胞7-羥基利培酮質量規格：美國進口7-Hydroxy Risperidone

人B母細胞;HMy2.CIR 人前列腺平滑肌細胞完全培養基 100mL羥基利托那韋質量規格：美國進口Hydroxy Ritonavir

人正常肝細胞;L-02去噻唑基甲氧基碳酰 利托那韋質量規格：美國進口Desthiazolylmethyloxycarbonyl Ritonavir

DDR1 Others Mouse 小鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 9'-去甲格拉司瓊（格拉司瓊雜質C）質量規格：美國進口9'-Desmethyl Granisetron (Granisetron Impurity C)
注意事項：
（1）凍存前細胞狀態，細胞*在對數生長期，細胞密度適合，剛剛發生細胞融合，過密或連成片的細胞狀態不好，而且消化時不容易分散；
（2）凍存的密度不宜過低，10的6次方-7次方的數量級比較好，我凍存的細胞一般T25培養瓶（5*107），一瓶凍一管（1.5ml凍存管），10cm培養皿（大概10的8次方個細胞）分成兩管。
（3）消化和吹打，切忌胰酶消化過度，吹打不可太用力，*不要吹出好多泡泡。消化后立即加入完全培養基吹打哦，不是加入凍存液再吹打。
（4）離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細胞株而言要求不是很嚴格，我從10%-90%都用過，問題不大，個人認為10%-20%可以了，能節約處就節約點嘛！另外，凍存液可以在處理細胞前配置，放在4度冰箱預冷。細胞離心后直接用預冷的凍存液重懸，移入凍存管。
（5）關于“慢凍”，傳統的方法，LLC細胞凍存管用棉花包好，4度2h，-20度2h或更長，-80度*，*液氮。對于條件較好的實驗室和細胞凍存數量多的實驗室，使用程序降溫盒，內裝異丙醇，在-80度并內可以逐漸降溫，很方便，省了包棉花、4度、-20度了。